IPTG的純化發(fā)展背景：
異丙基-β-硫代半乳糖苷（簡稱IPTG， CAS No:367-93-1）是一種性能極為優(yōu)越的誘導(dǎo)劑，由于其不易被細(xì)菌代謝，用于誘導(dǎo)蛋白表達(dá)具有良好的穩(wěn)定性，在實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)生產(chǎn)中廣泛使用。由于其廣泛的需求，人們對其合成研究很多。
 
作為一種分子生物學(xué)試劑，IPTG的性能與其產(chǎn)品質(zhì)量密切相關(guān)。一些不必要雜質(zhì)的存在會(huì)嚴(yán)重影響其誘導(dǎo)能力，又由于IPTG合成過程中容易產(chǎn)生諸如異丙基-α-硫代半乳糖苷等異構(gòu)體雜質(zhì)，且這些雜質(zhì)與IPTG結(jié)構(gòu)和物理化學(xué)性質(zhì)相似，難以通過常規(guī)的分離方法將其除去，導(dǎo)致通過這些方法合成的或市面上在售的IPTG其誘導(dǎo)表達(dá)能力被削弱。因此，急需一種方便的IPTG純化方法，提高通過目前方法合成的或市面上可購買的IPTG的純度與誘導(dǎo)能力。
 
為解決上述技術(shù)問題，湖南韻邦發(fā)明提供了一種IPTG的純化方法，以達(dá)到可以方便快速地分離純化IPTG，提高IPTG的純度與誘導(dǎo)能力的目的。
 
為達(dá)到上述目的，湖南韻邦改良提純的技術(shù)方案如下：
先將IPTG和互不相溶的兩種溶劑在加熱或常溫條件下制成雙相均沒有不溶性固體的溶液，再將該雙相體系降溫，析出IPTG晶體。所述互不相溶的兩種溶劑中一種為水，另一種為與水不溶的有機(jī)溶劑。
上述方案中，將IPTG、水以及有機(jī)溶劑一起加熱制備雙相均沒有不溶性固體的溶液，或者將IPTG和水先加熱一段時(shí)間再加入有機(jī)溶劑，或者將IPTG和有機(jī)溶劑先加熱一段時(shí)間再加入水。
 
上述方案中，所述有機(jī)溶劑包括乙醚、叔丁基甲基醚、二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、正丁醇、異丁醇、仲丁醇、叔丁醇、含4-10個(gè)碳原子的烷烴、石油醚、苯、含取代基的苯以及丁酮中的一種或幾種。
進(jìn)一步的方案中，所述含4-10個(gè)碳原子的烷烴具有以下結(jié)構(gòu)特征：CxHy，其中，x＝ 4～10，y＝8～22。
進(jìn)一步的方案中，所述含取代基的苯具有以下結(jié)構(gòu)特征：其中R為F、Cl、Br、I、NO2、OR1、NR2R3、R4中的一種；R1為氫原子，或?yàn)楹?～10個(gè)碳原子的烷基；R2和R3為氫原子，或?yàn)楹?～10個(gè)碳原子的烷基；R4為含1～10個(gè)碳原子的烷基。
更優(yōu)選的，所述加熱的溫度為40～110℃。
優(yōu)選的，互不相溶的兩種溶劑的總質(zhì)量與IPTG的質(zhì)量比為0 .5～50:1。
 
湖南韻邦IPTG提純工藝對行業(yè)產(chǎn)生的重大影響：
通過上述技術(shù)方案，湖南韻邦提供的IPTG的純化方法采用重結(jié)晶的方法進(jìn)行純化，通過控制結(jié)晶參數(shù)，可以得到不同晶型、不同純度的晶體。初始形成的晶核對所得晶體的晶型和純度有重要影響。
 
根據(jù)本發(fā)明提供的方法對IPTG進(jìn)行重結(jié)晶，由于結(jié)晶體系中存在油水界面，和一般結(jié)晶條件下晶核形成機(jī)制不同，所形成的晶體的晶型和純度也不同。這是本發(fā)明提供的方法能提供優(yōu)良IPTG產(chǎn)品的理論基礎(chǔ)。
 
湖南韻邦發(fā)明提供通過重結(jié)晶提高IPTG質(zhì)量的方法，操作簡便，易于工業(yè)化。且采用本發(fā)明提供的方法對IPTG進(jìn)行重結(jié)晶，所獲得的IPTG產(chǎn)品比采用單相溶劑體系對IPTG進(jìn)行重結(jié)晶獲得IPTG產(chǎn)品具有更好的外觀和純度。所得晶體可用于細(xì)菌內(nèi)蛋白表達(dá)的誘導(dǎo)，且具有更強(qiáng)的誘導(dǎo)能力，因此具有更高的附加價(jià)值。