?牛血清的主要成分及作用
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等。
胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少,所以胎牛血清是品質(zhì)最高的。
牛血清的作用:
1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
2. 提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.在細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)中是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
注意事項(xiàng):
1. 儲(chǔ)存和解凍血清時(shí)先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。
2、除去血清中的含絮狀沉淀, 離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里(一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。
3、一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_(kāi)始降解。
儲(chǔ)存條件:
血清一般儲(chǔ)存于-20℃,同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。購(gòu)買(mǎi)大包裝的血清后,首先要滅活處理,然后分裝成小包裝,儲(chǔ)存于-20℃,使用前融化。融化時(shí)最好現(xiàn)置于4℃。融化后的血清在4℃不宜長(zhǎng)時(shí)間存放,應(yīng)盡快使用。
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